El banano es clave para la producción agrícola de Ecuador. Es común requerir grandes cantidades de plantas que se obtienen por organogénesis directa. El uso de distintos SIT ha reportado superar limitaciones de los cultivos in vitro en contacto permanente con el medio de cultivo. El propósito de este trabajo fue evaluar la multiplicación de banano (Musa AAA cv. Williams), mediante el uso de un prototipo de SIT (PSIT) de origen local comparado con SIT RITA® y sistema semisólido (SS). A los 21 días se registraron datos de tasa de multiplicación por tipo de brote y brotes totales, longitud de pseudotallo y hoja 1, raíces totales por explante, masa fresca, ceniza, contenido de fenoles solubles totales (CFST) y actividad antioxidante (AA). Las vitroplantas del PSIT pre-sentaron una apariencia más verde, vigorosa y uniforme. No se encontraron diferencias significativas respecto a tasa total de multiplicación entre SIT. Las vitroplantas obtenidas en PSIT presentaron la mayor longitud del pseudotallo y de hoja 1, también mayor contenido de ceniza. No se encontraron di-ferencias significativas entre SIT respecto a masa fresca. El mayor CFST y mayor AA se evidenció en brotes obtenidos en PSIT. El uso de PSIT permite la obtención de vitroplantas de calidad superior al estándar, a la vez que se evidencia la optimización de la fase de multiplicación de brotes axilares de Musa cv. Williams.